Monkeypox Virus Denbora errealeko PCR Kit Irudi aipagarria

Monkeypox Virus Real Time PCR Kit

Deskribapen laburra:

katua.Ez	B001P-01	Tamaina	48 Probak/Kit
Alea	Seruma/ Lesio exudatua	Trans.& Sto.Tenperatura.	-25~-15℃
Formatua	Aurrenahasketa liofilizatu eta alikuota egin zen 8 tira PCR hodietan
Tresna aplikagarria	Denbora errealeko PCR tresna, hala nola ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio eta BTK-8

Bidali mezu elektronikoa

Produktuaren xehetasuna

Produktuen etiketak

Produktuaren xehetasunak

Aurreikusitako Erabilera

Monkeypox Birusa detektatzeko erabiltzen da giza serum edo lesioen exudate laginetan denbora errealeko PCR sistemak erabiliz.

Proba-printzipioa

Produktu hau zunda fluoreszenteetan oinarritutako Taqman® denbora errealeko PCR saiakuntza-sistema da.Monkeypox birusaren F3L genea detektatzeko abiarazle eta zunda espezifikoak diseinatu dira.Kontserbatutako giza geneari zuzendutako barne-kontrolak laginak biltzea, laginak maneiatzea eta denbora errealean PCR prozesua kontrolatzen ditu, emaitza faltsu-negatiboak saihesteko.Kita guztiz aurrenahasketa liofilizatutako sistema bat da, Monkeypox Birusa detektatzeko beharrezkoak diren materialak barne hartzen dituena: azido nukleikoa anplifikatzeko entzima, UDG entzima, erreakzio-buffer, primer espezifikoa eta zunda.

Eduki nagusiak

Emandako osagaiak taulan ageri dira.

Osagaiak	Paketea	Osagaia
Monkeypox BirusaAurrenahasketa liofilizatua	8 banda PCR hodi× 6 poltsa	Primerak, zundak, dNTP/dUTP nahasketa, Mg2+, Taq DNA polimerasa, UDG entzima
MPV Kontrol Positiboa	400 μL×1 hodi	Target genea duten DNA sekuentziak
MPV Kontrol Negatiboa	400 μL×1 hodi	Giza gene-segmentua duten DNA sekuentziak
Soluzio disolbatzailea	1 ml × 1 hodi	Egonkortzailea
Adostasun-ziurtagiria	1 pieza	/

Eragiketa Fluxua

1. LaginaBilduma:Espezieak hodi antzuetan bildu behar dira

zehaztapen tekniko estandarrekin.

2. Erreaktiboak prestatzea (erreaktiboak prestatzeko eremua)

Atera kitaren osagaiak, orekatu giro-tenperaturan egonean erabiltzeko.

3. Laginak prozesatzeko (Laginak prozesatzeko eremua)

3.1 Azido nukleikoen erauzketa

Azido nukleikoen erauzketarako 200μL-ko lagin likidoak, Kontrol Positiboa eta Kontrol Negatiboa hartzea gomendatzen da, DNA birikoaren erauzketa-kiten eskakizun eta prozeduren arabera.

3.2 Hauts liofilizatua disolbatzea eta txantiloia gehitzea

Prestatu Monkeypox Virus Lyophilized aurrenahasketa lagin kopuruaren arabera.Lagin batek PCR hodi bat behar du liofilizatutako aurrenahasketa hautsa duen.Kontrol negatiboa eta kontrol positiboa bi lagin gisa tratatu behar dira.

(1) Gehitu 15μL disolbatzaile-disoluzioa liofilizatutako aurrenahasketa duen PCR tutu bakoitzean, eta ondoren 5μL ateratako laginak/Kontrol negatiboa/Kontrol positiboa gehitu PCR hodi bakoitzean hurrenez hurren.

(2) Estali PCR hodiak ondo, moztu PCR hodiak eskuz hauts liofilizatua guztiz disolbatu eta nahastu arte, bildu likidoa PCR hodien hondoan abiadura baxuko zentrifugazioaren bidez.

(3) Detektatzeko denbora errealeko PCR tresna arrunta erabiltzen baduzu, zuzenean transferitu PCR hodiak anplifikazio eremura;BTK-8 detektatzeko erabiltzen baduzu, eragiketa hauek egin behar dituzu: PCR hoditik 10 μL likido transferitu BTK-8-ren erreakzio-txiparen putzura.PCR hodi bat txiparen putzu bati dagokio.Pipetatze-eragiketa bitartean, ziurtatu pipeta 90 gradu bertikal dagoela.Aerosolen hesiaren pipetaren puntak putzuaren erdian jarri behar dira indar moderatuz eta pipeta bultzatzeari utzi behar zaio lehenengo martxara iristen denean (burbuilak saihesteko).Putzuak bete ondoren, erreakzio txiparen mintz bat atera putzu guztiak estaltzeko eta txipa anplifikazioa detektatzeko gunera eramaten da.

4. PCR Anplifikazioa (Detekzio Eremua)

4.1 Jarri PCR hodiak/erreakzio-txipa erreakzio-tanga eta ezarri erreakzio-putzu bakoitzaren izenak dagokion ordenan.

4.2 Detekzio fluoreszentzia ezarpenak: (1) Monkeypox birusa (FAM);(2) Barne Kontrola (CY5).

4.3 Exekutatu txirrindularitza-protokolo hau

ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio-ren protokoloa:

Urratsak		Tenperatura	Denbora	Zikloak
1	Desnaturalizazioaren aurrekoa	95℃	2 min	1
2	Desnaturalizazioa	95℃	10 s	45
2	Erretiroa, luzapena, fluoreszentzia eskuratzea	60℃	30 s	45

BTK-8 protokoloa:

Urratsak		Tenperatura	Denbora	Zikloak
1	Desnaturalizazioaren aurrekoa	95℃	2 min	1
2	Desnaturalizazioa	95℃	5 s	45
2	Erretiroa, luzapena, fluoreszentzia eskuratzea	60℃	14 s	45

5. Emaitzen azterketa (mesedez, ikusi tresnaren Erabiltzailearen eskuliburua)

Erreakzioaren ondoren, emaitzak automatikoki gordeko dira.Sakatu "Analisi" aztertzeko, eta tresnak automatikoki interpretatuko ditu lagin bakoitzaren Ct balioak emaitzen zutabean.Kontrolaren emaitza negatibo eta positiboak "6. Kalitate Kontrola" honako hauetara egokituko dira.

6. Kalitate kontrola

6.1 Kontrol negatiboa: Ez Ct edo Ct>40 FAM kanalean, Ct≤40 CY5 kanalean anplifikazio kurba normalarekin.

6.2 Kontrol positiboa: Ct≤35 FAM kanalean anplifikazio kurba normalarekin, Ct≤40 CY5 kanalean anplifikazio kurba normalarekin.

6.3 Emaitza baliozkoa da aurreko irizpide guztiak betetzen badira.Bestela, emaitza baliogabea da.

Emaitzen Interpretazioa

Emaitza hauek posible dira:

	FAM kanalaren Ct balioa	CY5 kanalaren Ct balioa	Interpretazioa
1#	Ez Ct edo Ct>40	≤40	Monkeypox birusa negatiboa
2#	≤40	Edozein emaitza	Monkeypox birusa positiboa
3#	40~45	≤40	Berriro proba;oraindik 40~45 bada, jakinarazi 1# gisa
4#	Ez Ct edo Ct>40	Ez Ct edo Ct>40	Baliogabea

OHAR: Emaitza baliogabea gertatzen bada, lagina bildu eta berriro probatu behar da.

Eskaeraren informazioa

produktuaren izena	katua.Ez	Tamaina	Alea	Iraupena	Trans.& Sto.Tenperatura.
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit	B001P-01	48 proba/kit	Seruma/ Lesio exudatua	12 Hilabete	-25~-15℃